概念：

外泌体是由所有体外和体内细胞持续分泌的小膜泡 (30–150nm)，特指直径在40-100nm的盘状囊泡，包含了复杂RNA和蛋白质。外泌体天然存在于包括血液、唾液、尿液、脑脊液和乳汁等体液中。这些特异性分泌的细胞外囊泡可以介导细胞间通讯和信号转导。

原理与方法：

外泌体收集：①差速离心是外泌体分离的最常见技术之一，利用不同成分离心力不同，适合大量提取培养基中外泌体成分。②超滤法根据外泌体尺寸大小进行分离，适用于细胞上清的提取，适用于纯化大量外泌体。 ③凝胶排阻层析法，根据外泌体尺寸大小进行分离，适合中等样本量。④亲和捕获法，依赖于结合外泌体的抗体进行捕获，适合分离特定外泌体。

外泌体鉴定：①纳米颗粒跟踪分析技术（Nanoparticle Tracking Analysis，NTA）利用光散射和布朗运动的原理，获得悬浮液中的样本粒径分布的检测方法，能对悬浮液中的颗粒进行全方位表征。分辨率高、检测速度快、准确度高。②透射电镜是鉴定外泌体的金标准，点分辨率可以达到0.1nm，适合用来观察外泌体类囊泡。③利用外泌体膜蛋白的抗体对外泌体进行标记，再用胶体金二抗指示出抗原的位置。胶体金在电镜下呈现出黑色颗粒，同时从形态学及免疫学上鉴定外泌体。④外泌体形成和释放后，会带上特定的标志性蛋白，利用WB对这些蛋白进行检测，鉴定外泌体。

                                         外泌体鉴定